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微生物实验室压力蒸汽灭菌工艺验证
来源: | 作者:4001350535 | 发布时间: 2021-10-04 | 97 次浏览 | 分享到:

微生物实验室压力蒸汽灭菌工艺验证

灭菌工艺验证 

初次投入使用前,经过大修或调试后,均应进行灭菌工艺的验证程序。

一.温度验证:

(1)取1000、500、250m1三角烧瓶各1只,分别加入800、400、200m1生理盐水;取中试管4支,各加入5m1生理盐水和1支压力蒸汽灭菌化学指示管。

(2)将3支装有指示管的中试管和3支留点温度计分别悬置于3只三角烧瓶中心位置(试管浸入三角烧瓶中的盐水中,不能偏斜),三角烧瓶用棉塞塞住,盖上二层牛皮纸,用线扎紧。将另1支留点温度计放入另1支中试管中。

(3)将上述三角烧瓶和中试管置于灭菌桶内,设定121℃20mim灭菌桶内灭菌物品的装载容量与常规灭菌时相同,约为70%左右。

(4)灭菌完毕冷却后观察:留点温度计应指示121℃;化学指示管内的药片完全熔化,表示容器内温度达到121℃并能持续20mim如不完全熔化,则应增加设定时间,重新试验,直至完全熔化为止。

二.灭菌效果验证:

(1)取1000、500、250m1三角烧瓶各1只,分别加入800、400、200m1生理盐水;取6支内装5ml溴甲酚紫蛋白胨水的中试管,在4支中试管中各加入1片嗜热脂肪芽胞菌片,另2支不加菌片(对照管),各用棉塞塞住试管口。

(2)将3支加入菌片的中试管分别悬置于3只三角烧瓶中心位置,三角烧瓶用棉塞塞住,盖上二层牛皮纸,用线扎紧。

(3)将上述三角烧瓶和中试管置于灭菌桶内,设定12f℃15min灭菌桶内灭菌物品的装载容量约为70%左右。

(4)灭菌完毕冷却后,取出中试管,2支对照试管中,1支加入1片嗜热脂肪芽胞菌片,作为阳性对照,另1支作为阴性对照。将6支中试管置54℃土1℃条件下培养48h。

(5)结果观察和判定:阴性对照和阴性结果:无菌生长,液体清晰,培养基不变色。阳性对照和阳性结果:有菌生长,液体混浊,培养基紫色变为黄色。阳性对照管和1000m1三角烧瓶中试管应有菌生长,阴性对照及其余3支试管应无菌生长为灭菌合格,否则为灭菌不合格。

(6)重复上述操作,温度不变,设定时间分别为20、21、22m im…,直至灭菌合格为止。记录结果。

三.灭菌工艺确定:

(1)以上述检测结果显示灭菌合格的最低时间为基准,连续进行3次灭菌效果检测,3次检测结果均合格方为有效。

(2)论证确认:以上述3次灭菌均合格的灭菌温度和时间确定为常规灭菌工艺。

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